Ya todas las plantas florecieron y tengo los datos que necesito para planear mis experimentos futuros. Pero veamos primero cuáles fueron los resultados: De los 18 genotipos que crecí, hubo una diferencia de 11 días desde el que floreció más temprano (G18) del que lo hizo más tarde (G01). Esto me va a ayudar a preparar un calendario para empezar a crecer las plantas a distintos tiempos y sincronizar el momento en que florecen, aumento la posibilidad de que las semillas de todas las plantas se desarrollen y maduren al mismo tiempo.
Entonces, voy a empezar a crecer primero los genotipos que se encuentran a la izquierda del gráfico, siguiendo el orden hacia la derecha. Por ejemplo, si empiezo a crecer G01 el día de hoy, martes 5 de Septiembre, voy a plantar G02 y G03 mañana, G04 pasado mañana, G05 y G06 en 4 días, y así sucesivamente hasta llegar a plantar G18 el día sábado 16 de Septiembre. Todas las plantas deberían florecer el día 28 de Septiembre y deberían estar listas para ser cosechadas entre un mes y medio y dos meses después. Ya está todo entonces para planear el experimento, ¡muy pronto tendré novedades!
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Comencé a contar el número de hojas que las plantas desarrollan para tener un estimado del tiempo a floración de las líneas que estoy creciendo en las cámaras y condiciones que estoy usando.
Hay varias formas para cuantificar el tiempo que una planta tarda en florecer. La más obvia es la cantidad de días que toman desde que la semillas germina hasta que la planta generada por esa semilla empieza a desarrollar flores en vez de hojas (al menos para Arabidopsis, la especie que utilizo, que es una planta anual). Otra manera es la de contar el número de hojas que desarrolla antes de empezar a producir flores. Esta es una manera más correcta desde el punto de vista del desarrollo ya que no todas las líneas que uso producen hojas con la misma velocidad. Para hacer esto, cada vez que cuento hojas las marco con un marcador permanente grueso tratando de no dañarlas. En cada toma nueva de datos, marco las hojas nuevas. Esto también ayuda a que no cuente la misma hoja varias veces. Como los diferentes genotipos (líneas) que uso tienen algunos pequeñas diferencias en floración, necesito contar las hojas cada 3 o 4 días para tener la medición más precisa que pueda. Otro tema a tener en cuenta es la replicación del experimento: para que la fecha estimada de floración sea la más exacta posible para cada línea, necesito crecer varias plantas de cada uno de los genotipos y disponerlas al azar en las bandejas que contienen las macetas, así como dentro de la cámara (pequeñas diferencias en las condiciones de crecimiento pueden causar una gran variación en el crecimiento y desarrollo). Esto permite que si hay alguna variación en las condiciones del crecimiento en algún lugar en particular de la cámara o bandeja, ésta sea amortizada por la presencia de otras plantas en diferentes lugares de varias plantas de la misma línea. Al final, el tiempo de floración de cada genotipo será el promedio del tiempo que les ha tomado para florecer a cada planta de la misma línea. ¿Querés saber más sobre esto? Pronto estaré compartiendo los resultados porque muchas de mis plantitas ¡ya comenzaron a florecer! Las semillas germinaron y las plantulitas (plantas bebé) aparecieron. Estas plántulas tienen 3 días, todavía son muy pequeñas y aún no han desarrollado hojas verdaderas (las hojitas que tienen son hojas embrionarias que se desarrollaron durante el desarrollo de la semilla luego de la fertilización). Así como son de pequeñas, son también muy vulnerables: las semillas son sumamente resistentes a las condiciones extremas del ambiente mientras que las plántulas son mucho más susceptibles aún a cambios ambientales pequeños.
El nuevo experimento para tomar datos sobre tiempo a floración empezó. Incubé las semillas por casi una semana en placas con agar (algo muy parecido a la gelatina sin sabor) en la heladera para estratificarlas. Este tiempo en el frío hace que la dormición baje y las semillas germinen homogéneamente. Una semilla con dormición está "dormida" en espera de que las condiciones ambientales sean las ideales para que se produzca la germinación. La dormición es un bloqueo de la germinación que ayuda a las semillas a precibir de manera precisa el ambiente y ponderar cuáles son las mejores condiciones para germinar, y también para el establecimiento posterior de la plantulita y el crecimiento de la planta. Sin la dormición, las semillas podrían germinar fuera de temporada en condiciones buenas pero efímeras y que rápidamente se convertirían en estresantes, en consecuencia disminuyendo las chances de supervivencia de la planta en crecimiento. Las semillas ya están en las macetas, ¡ahora a esperar por las plantitas bebé!
Mis plantas no lucían muy bien como pueden ver en la foto más arriba. El experimento falló, entonces hablemos un poco de las distintas razones por las que un experimento puede fallar.
Yo comenté previamente que necesito plantas felices que produzcan muchas semillas para usar en los ensayos de germinación, como se ve en la foto, las plantas no estaban felices y lucen estresadas. Una de las razones es que el lote de suelo usado para las macetas era muy ácido (según comprobamos), más de lo que las plantas pueden tolerar sin consecuencias. Otra razón podría haber sido que, aunque las macetas lucían bien regadas y húmedas, se secaran más de lo tolerable por ellas generando un estrés por falta de agua. La tercera razón posible es el hongo que parece estar creciendo en la capa superior del suelo que afectó su crecimiento. De todas maneras, cuando las plantas sufren algún tipo de estrés suelen adelantar su tiempo a floración. Este mecanismo lo usan para tratar de asegurarse de dejar descendencia contra todas las desventajas, algunas lográndolo y otras no. Como yo necesito datos confiables de tiempo a floración para poder sincronizar mis plantas y cosechar mis semillas todas al mismo tiempo, necesito empezar nuevamente el experimento. ¡Sigan este blog o mi cuenta de Twitter para ver actualizaciones sobre cómo va creciendo el nuevo lote de plantas! |
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Escribimos sobre cosas que nos llaman la atención, experiencias, artículos interesantes (propios y ajenos), experimentos y noticias del laboratorio. Archivo
Octubre 2023
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